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WB實驗代測 檢測服務
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WB實驗代測服務項目:WB檢測/抗體費用樣本運輸要求:1、組織新鮮標本,100mg以上(綠豆大小);2、細胞數106離心收集沉淀,綠豆大小。3、全程干冰運輸。信帆生物提供各類實驗代測服務,更多服務項目歡迎致電咨詢,我們將竭誠為您服務!
WB實驗代測
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。
Western blotting服務實驗流程
u 細胞及組織蛋白質抽提;
u 蛋白質定量;
u 變性聚丙烯酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE);
u 蛋白質轉膜;
u 膜的封閉;
u 一抗、二抗孵育;
u 結果檢測:化學發光法檢測,X 膠片曝光顯影;
u 數據分析;
代測說明:
1、有趨勢,不需做預實驗。
2、沒有趨勢,要求做預實驗。
3、WB檢測里包含了蛋白提取。
4、實驗結束,返還膠圖。
5、一個指標只能跑一張膜
WB實驗代測的優勢:
1、western免疫印跡是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。
2、與southern或northern雜交方法類似,但western免疫印跡采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針"是抗體,“顯色"用標記的二抗。
3、經過page分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。
4、以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。