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單胺氧化酶（MAO）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：以芐胺為底物,在MA0作用下,生成芐醛,以環(huán)已烷提取,在242nm下測(cè)定吸光度,可測(cè)算出酶的活力。

單胺氧化酶是一種具有多個(gè)結(jié)合部位的單一分子酶，對(duì)底物的特異性不高，可使多種胺類(lèi)氧化脫氨。單胺氧化酶含有銅離子，分布在肝、腎等組織的線粒體中，其含量依次為肝、心、腎、腦、肺、骨骼肌，血小板和胎盤(pán)中也含有單胺氧化酶。單胺氧化酶參與膠原纖維的生成，因此一些纖維化疾病時(shí)該酶往往升高。測(cè)定血清中酶活性可以反映其在結(jié)締組織中的活性，從而了解組織纖維化的程度。

肌酸激酶CK催化三磷酸腺苷和肌酸，生成磷酸肌酸，后者很快全部水解為磷酸，此時(shí)三磷酸腺苷和二磷酸腺苷仍穩(wěn)定，加入鉬酸銨可生成磷鉬酸，可進(jìn)一步還原成鉬藍(lán)，根據(jù)生成無(wú)機(jī)磷的量可算出酶的活力。
    測(cè)定MAO主要用于研究肝硬化.肝硬化時(shí)MAO活性常明顯增高,陽(yáng)性率可達(dá)80%以上.其活性與用腹腔鏡觀察肝臟表面結(jié)節(jié)形成的過(guò)程相平行,增高程度與組織學(xué)檢查肝臟的結(jié)蹄組織增生和小葉結(jié)構(gòu)的扭曲密切相關(guān).暴發(fā)性肝炎時(shí)由于本酶從壞死的肝細(xì)胞逸出可以增高,慢性肝炎活動(dòng)時(shí)有增高傾向.糖尿病、機(jī)能亢進(jìn),肢端肥大癥,心力衰竭引起的肝瘀血等疾病也有增高傾向.

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
2、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.5%。
3、回收試驗(yàn)： X =102%。
4、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
5、測(cè)試面廣：可測(cè)各種動(dòng)物血清(漿)、組織，效果均佳。
所需儀器及自備試劑：
1、紫外分光光度計(jì)（比色測(cè)定波長(zhǎng)為242nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。

操作流程：
1、按步驟加入樣本和R1、R2
2、漩渦混勻，37℃孵育3小時(shí)
3、加入R3、R4, 抽提2分鐘,3500r/min離心10min
4、242nm波長(zhǎng)，1cm光徑，比色

單胺氧化酶（MAO）實(shí)驗(yàn)代測(cè)