T細胞亞群檢測試劑盒的組成成分有哪些
更新時間:2018-12-05 點擊次數:1431次T細胞亞群檢測試劑盒的組成成分有哪些?
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T細胞亞群檢測試劑盒組成:
1. 防脫片劑2ml
2. 固定液10ml
3. A 小鼠抗人CD3 單抗1ml
B 小鼠抗人CD4 單抗1ml
C 小鼠抗人CD8 單抗1ml
4. 生物素標記羊抗小鼠IgG( IgG/Bio) 1.5ml × 2
5. 堿性磷酸酶標記鏈霉卵白素(S-A/AP) 1.5ml × 2
6. A 底物增強劑( 40×) 200μl
B 底物液( 40× ) 200μl
C 底物緩沖液( 10× ) 800μl
7. 細胞核復染液5ml
8. 封片劑1ml
9. 記號筆1 支
10. PBS 2 包(1000ml)
T細胞亞群檢測試劑盒標本制備:
取肝素抗凝(25μl/ml)的靜脈血1~2ml,PBS 稀釋1-2 倍后,沿裝有等量淋巴細
胞分離液的試管壁混勻緩慢加至液面上層,保持兩種液體界面清晰,離心(2000
轉/分)15-20 分鐘,吸取兩液面交界處的單個核細胞層,加5 倍PBS,離心(1000
轉/分)5 分鐘,棄上清液,沉淀即為單個核細胞。利用試管中剩余的少許回流
液體(約一滴)混勻細胞,制成單個核細胞懸液。滴30μl 細胞懸液于載玻片上,
靜置2 分鐘使細胞下沉粘附于玻片上,吸去液體,快速吹干或37℃溫箱1 小時
烤干。或用PBS 將單個核細胞調至2×105 個/ml,離心涂片機1000 轉離心1-2
分鐘制片,快速吹干或37℃溫箱1 小時烤干。涂片前取防脫片劑5-10μl 均勻推
片,亦可用棉簽粘取防脫片劑均勻涂于干凈玻片上,待干后制備細胞涂片,以防
掉片。
T細胞是一個不均一的細胞群體,分類方法有多種.按細胞表面分化抗原(CD)的不同,可分為CD4+和CD8+兩大亞群;按T細胞表面受體(TCR)的不同,可分為αβT細胞γδT細胞;按功能可分為輔助性T細胞(Th 細胞)、抑制性T細胞(Ts細胞)、細胞毒T細胞(CTL或Tc細胞)和遲發型超敏反應T細胞(TDTH細胞);按對抗原應答的不同,分為初始T細胞(naive T cell)、活化的T細胞(activated T cell)和記憶性T細胞(memory T cell);以及區別于傳統T細胞的NKT細胞等等
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