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雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡介!

更新時間:2017-11-24   點擊次數(shù):1122次

雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡介!

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀70年代初問世 以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用 于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。

檢測目的:

本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細胞介素2(IL-2)含量。

雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡介!

實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞白細胞介素2(IL-2)水平。用純化 的雞白細胞介素2(IL-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中 依次加入白細胞介素2(IL-2),再與 HRP 標(biāo)記的白細胞介素2(IL-2)抗 體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素2(IL-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo) 準(zhǔn)曲線計算樣品中雞白細胞介素2(IL-2)濃度。

操作步驟:

  • 標(biāo)準(zhǔn)提供標(biāo)準(zhǔn)戶可管中行稀 釋。

180ng/L

5 號標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

90ng/L

4 號標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

45ng/L

3 號標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

22.5ng/L

2 號標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

11.25ng/L

1 號標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

  • 加樣設(shè)白對標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測標(biāo)被板標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn) 50µl測樣 40µl, 然后 10µl樣品zui 5 加樣標(biāo),盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
  • 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同 3
  • 洗滌:操作同 5
  • 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
  • 終止終止 50µl,終應(yīng)轉(zhuǎn)黃
  • 測定調(diào)450nm 波長依OD  應(yīng)加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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  • 保存條件及有效期:
  • 12-8

    2.有效期:6 個月

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