低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測試盒的樣本處理
更新時間：2023-12-11 點(diǎn)擊次數(shù)：246次低密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒的樣本處理
（直接法 分光光度計(jì)法）
一、試劑組成及配制:
二、測定步驟：
1、樣本處理:
①、血清(漿)：直接測定，如超過線性范圍用生理鹽水稀
釋后測定。
②、培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 10
分鐘，取上清測定。
[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬個/mL 以上。
③、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g)：體積
(mL)=1：9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿
介質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/
分，離心 10 分鐘，取上清液待測。
[注]:1、如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸
鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。
2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿
介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取。
④、細(xì)胞樣本：
A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/
分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；用
等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸鹽
緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉(zhuǎn)/分，離心
10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；
B、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的勻漿介質(zhì)（推薦
0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水）
進(jìn)行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W，
3～5 秒/次，間隔 30 秒，重復(fù) 3～5 次)或手動勻
漿，制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采
用裂解液裂解(推薦 TritonX-100，1～2%，裂解
30～40 分鐘)，裂解好的液體不離心直接測定。
[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬個/mL 以上。破碎好的
液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎
低密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒的樣本處理
