超微量 Ca +2Mg +2—ATP 酶測試盒的測定意義
更新時間：2023-12-08 點擊次數：239次超微量 Ca +2Mg +2—ATP 酶測試盒的測定意義
(測紅細胞)
一、測定意義：
ATP 酶存在于組織細胞及細胞器的膜上，是生物膜
上的一種蛋白酶，它在物質運送、能量轉換以及信息傳
遞方面具有重要的作用，機體在缺氧及一些疾病狀態下，
此酶活力發生一系列改變。
二、測定原理：
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷，測定無機磷的
量可判斷 ATP 酶活力的高低。
三、試劑組成與配制：（試劑盒有效期 6 個月）
四、紅細胞的前處理：
1、紅細胞計數（見附錄）或血紅蛋白測定（試劑本所有售）。
2、紅細胞溶血液的制備：
a、壓積紅細胞溶血液的制備：取肝素抗凝全血，1000
轉/分，離心 10 分鐘，棄上層血清，留下層壓積紅
細胞，取一定量的壓積紅細胞，加 49 倍的雙蒸水，
例如取 5μL 的壓積紅細胞加入 245μL 雙蒸水中，混
勻，使其充分溶血，對光觀察直至溶液透亮。如果
預試結果太高，再將溶血液稀釋成不同濃度再進行
預試后，再決定取樣濃度。
b、全血紅細胞溶血液的制備：取小鼠全血，輕輕搖勻，
取一定量的全血按照 1：
24 的體積比加 24 倍雙蒸水，
制成 25 倍稀釋的溶血液，例如取 5μL 的全血加雙蒸
水 120μL 充分混勻，制成 25 倍稀釋的溶血液。對光
觀察直至溶液透亮。如果預試結果太高，再將溶血
液稀釋成不同濃度再進行預試后，再決定取樣濃度。
[注 1]：制備好的溶血液盡快進行檢測，否則易失活，
因而必須在所有的準備工作做好以后再配制
溶血液。
[注 2]：用不完的抗凝全血 4℃可保存 2～3 天， -20℃
以下保存一周或者更長時間。
[注 3]：不可用磷酸鹽緩沖液或含磷的試劑稀釋樣本。
[注 4]：預試結果將絕對吸光度值（測定管吸光度值—
對照管吸光度值）控制在 0.2 左右為宜。
附錄Ⅰ：紅細胞計數法
紅細胞計數有以下三種方法，只需取其中一種即可以。
1、計數板直接紅細胞計數：
①、紅細胞稀釋液的配制：檸檬酸三鈉 3.8 克，甲醛
1mL，雙蒸水 100mL，混勻，4℃保存。
②、取 1 支試管，加入紅細胞稀釋液 2mL，取抗凝全
血 10µl 加入試管稀釋液中，反復吹吸數次，
再將試管顛倒數次混勻。
③、取一滴稀釋血液灌入計數板。（應一次灌滿，而且
不要灌得太多。）
④、用高倍鏡計數左上、左下、右上、右下，中央 5
個中方格的紅細胞數，將數得的數字×10 10，
即為每升血中的紅細胞數。
2、光電比濁法計紅細胞數：
取試管 1 支，加入上述紅細胞稀釋液 4mL，再
取 20µl 抗凝全血，加入 4mL 稀釋液中，反復吹吸數
次，再將試管顛倒數次混勻，立即倒入比色杯中，
于 540nm，1cm 光徑，雙蒸水調零進行比色，記下
吸光度值。以計數板計數的紅細胞的數值為橫坐標，
以相應管的吸光度值為縱坐標，作標準曲線。您可
以不做曲線，用附錄Ⅱ參考標準曲線圖二（鼠紅細
胞數與比濁法吸光度換算曲線）。根據標準曲線查出
紅細胞數。
3、用血紅蛋白（Hb）來換算紅細胞數：
取 10µl 抗凝全血加入 2.5mL 血紅蛋白測試液
（本所有供應）中，混勻，靜置 10 分鐘，于 540nm，
1cm 光徑，雙蒸水調零進行比色。將測得的吸光度
乘以 367.7 即為血紅蛋白的值。以計數板計數的紅細
胞的數值為橫坐標，以相應管的血紅蛋白數為縱坐
標，作標準曲線。您可以不做曲線，用附錄Ⅱ的參
考標準曲線圖一（鼠紅細胞數與血紅蛋白數的換算
曲線）。根據標準曲線查出紅細胞數。
超微量 Ca +2Mg +2—ATP 酶測試盒的測定意義
